【儀器設(shè)備網(wǎng) 行業(yè)應(yīng)用】本方案中，我們使用華法林和呋塞米作為代表性分子，在?家典型的發(fā)現(xiàn)生物分析實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展了研究。我們研究Xevo TQ Absolute串聯(lián)四極桿質(zhì)譜儀這款新產(chǎn)品如何高靈敏度定量人和大鼠血漿中的華法林和呋塞米。

使用ACQUITY Premier UPLC系統(tǒng)和Xevo TQ Absolute串聯(lián)四極桿質(zhì)譜儀定量從人和大鼠血漿中提取的華法林和呋塞米。能夠?qū)崿F(xiàn)：人和大鼠血漿中華法林和呋塞米的LLOQ分別為25 pg/mL和100 pg/mL;校準(zhǔn)曲線和各QC濃度上所有點(diǎn)的%CV均<12%，完全位于生物分析驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)的允許范圍內(nèi)。ACQUITY Premier UPLC系統(tǒng)和Xevo TQ Absolute串聯(lián)四極桿質(zhì)譜儀可提供優(yōu)異的穩(wěn)定性和靈敏度，且方法性能不受影響，因此是適用于發(fā)現(xiàn)生物分析實(shí)驗(yàn)室的理想平臺(tái)。

實(shí)驗(yàn)部分

1樣品前處理

用100 ng/mL的華法林和呋塞米儲(chǔ)備液加標(biāo)大鼠和人血漿，建立0.025 - 100 ng/mL的校準(zhǔn)曲線。使用單獨(dú)儲(chǔ)備液(100 ng/mL)生成LLOQ、LQC、MQC和HQC的QC樣品。使用乙腈按1:3的比例進(jìn)行蛋白沉淀，所有樣品均提取100 μL，?式三份。將樣品離心，上清液轉(zhuǎn)移到LC-MS樣品瓶以供分析。

2液相色譜條件

液相色譜系統(tǒng)：ACQUITY Premier UPLC系統(tǒng)

色譜柱：MaxPeak UPLC HSS T3 2.1 x 50 mm色譜柱

柱溫：60°C

樣品溫度：5°C

進(jìn)樣體積：1 μL

流速：600 μL/min

流動(dòng)相A：含0.01%甲酸的100%水溶液

流動(dòng)相B：含0.01%甲酸的100%乙腈溶液

梯度：在1.5 min內(nèi)從5%增?95%

3質(zhì)譜條件

質(zhì)譜系統(tǒng)：Xevo TQ Absolute

電離模式：ESI-

毛細(xì)管電壓：0.5 kV

MRM通道：

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